(西安市产品质量监督检验所，陕西 西安 710065)
摘 要：文章介绍了通过高效液相色谱法与分光光度计法等多个检测方法，测定紫阳产绞股蓝的主要功效成分的过程，并将其与其他植物比较得出其具有独特的功效作用。
关键词：绞股蓝；皂甙；硒
中图分类号：R282.7 文献标识码：A 文章编号：1007—6921(2008)12—0037—02
绞股蓝又名七叶胆、五叶参，自然生长于陕西南部，湖北西部山区，绞股蓝在古时民间已被广泛使用，把它作为“神奇”的“不老长寿药草”。明代称之为“神仙草”。绞股蓝其名始于1525年明嘉定四年朱棣所著《救荒本草》一书，中国药典亦称绞股蓝。
现在查明，绞股蓝主要成分为绞股蓝皂甙(GP)，皂甙、黄酮、多糖、氨基酸、微量元素。皂甙成分：目前已分得单体皂甙83种，均属达玛脂烷醇类结构，其中绞股蓝皂甙3、4、8 、X2分别与人参皂甙Rb1、Rd3、Rb、F2是同一物质，绞股蓝皂甙 1酶解，得人参皂甙K3，绞股蓝皂甙V-AH与人参皂甙Rg3相同，其余均可视为 原人参二醇及原人参三醇的异构体。氨基酸：共有18种氨基酸，其中有6种人体必需的氨基酸。微量元素：绞股蓝含有的各种常量元素和微量元素，人体所需的微量元素锰(Mm)、锌(Zn )、铁(Fe)等在绞股蓝中含量较高，陕西产地的绞股蓝中含有硒(Se)，黄酮类化合物，多糖。经初步分析绞股蓝、叶中均含有果糖、葡萄糖、半乳糖和低聚糖。
为进一步研究绞股蓝功效成分具体含量，笔者对市售紫阳县绞股蓝茶叶做了全面的成分分析，为使数据有参考性，特同时做一紫阳陕青茶叶作一对比，现将最主要功效成分分析方法陈述如下：
1 绞股蓝皂甙含量测定
1.1 试剂
甲醇(色谱纯)；水(重蒸水)；绞股蓝皂甙标准品(纯度≥98%)。
绞股蓝皂甙标准溶液的制备：精确称取绞股蓝皂甙标准品10mg，加流动相甲醇+水（55+45）溶解并移入100mL容量瓶中，定容至刻度。
1.2 仪器设备
高效液相色谱仪、附紫外检测器；
色谱柱：C18（以十八烷基键合硅胶填料为填充剂）或具同等性能的色谱柱，150mm×6mm，5μm；超声波清洗器；
C18净化富集柱：C18预柱装量0.5g，分配型；
离心机：3 000r/min。
1.3 色谱分离条件
流动相：甲醇+水=55+45
流速：1mL/min
柱温：40℃
检测波长：293nm
灵敏度：0.016AUFS
进样量：10μL
1.4 分析步骤
试样制备：将固体试样粉碎成粉末状，混匀。准确称取上述经处理后的试样1.00g于50mL容量瓶中，加检测用流动相30mL溶解，经超声振提5min加流动相定容50mL，离心沉淀，上清液经滤膜（0.45μm）过滤。
测定步骤：分别精密吸取标准溶液和试样溶液10μL注入高效液相色谱仪，依上述色谱条件，以保留时间定性，用外标法计算试样中绞股蓝皂甙的含量。
最终测得绞股蓝1#样品与2#样品皂甙含量为2.68,2.74，而茶叶的绞股蓝皂甙的含量为未检出。
2 微量元素中硒含量的测定
2.1 试剂和材料
硫酸：优级纯
混合酸：硝酸——硫酸——高氯酸(14+2+2)
乙二胺四乙酸二钠(EDTA一2Na)溶液：0.1％
盐酸羟胺溶液：10％
氨水溶液(1+1)
盐酸溶液(1+1)
盐酸溶液：0.1mol／L
环己烷：经测定无荧光杂质，有必要时重蒸馏后使用。
甲酚红指示剂：称取0.1g甲酚红，加1滴50％氢氧化钠和10mL水溶解，并稀释到50mL。
2，3一二氨基萘(DAN)溶液：在暗室中配制。称取0.1g DAN，加0.1 mol／L盐酸溶液100mL，振摇使其溶解。将溶液转入250mL分液漏斗中，加20mL环己烷，剧烈振摇5min，静置分层后，弃去环已烷相。再加入20mL环己烷，重复萃取三次，收集水相于100mL棕色容量瓶，用水定容并覆盖一层环己烷，储存于冰箱中，每次临用前再用20mL环己烷萃取一次。
硒标准溶液：准确称取0.1000 g硒(纯度≥99.9％)，加5 mL硝酸，温热使其溶解；加水稀释到100 mL，此溶液每毫升相当于100 pg硒。硒标准工作液：吸取10.0 mL硒标准溶液置于100 mL容量瓶，以0.1 mol／L盐酸溶液稀释至刻度，混匀，依次稀释到每毫升相当于0.1 pg硒。
2.2 仪器和设备
荧光分光光度计
凯氏烧瓶：250 mL
分液漏斗：125 mL，250 mL
电热恒温水浴锅
控温电炉
具塞三角烧瓶：100 mL
具塞刻度试管：5 mL
称取1.00 g样品置于250 mL凯氏烧瓶中，用少量水润湿样品，加入18 mL混合酸，在控温电炉上加热消化。应逐渐升高温度，消化至冒高氯酸白烟，保持1 min，此时溶液呈无色或浅黄色，即为消化终点(在消化过程中如出现炭化现象，需重新取样消化)。取下冷却，加20 mL水，继续加热至冒高氯酸白烟；取下稍冷，加l0 mL水，待冷却到室温，用20 mL～30 mL水将样液转入100 mL具塞三角烧瓶中，加0.19／6EDTA一2Na溶液2 mL。
按样品操作步骤，同时做试剂空白及相应含量的硒标准。
在上述消化液中加入2滴甲酚红指示剂，以氨水溶液(1+1)和盐酸溶液(1+1)调节至溶液呈微橙红色。然后，加10％盐酸羟胺溶液1 mL，放置2 min，以下步骤需在暗室内进行。各加入DAN溶液2 mL，摇匀，置沸水浴中加热5 min，取出，冷却到室温。全部溶液转入125 mL分液漏斗中，加入5 mL环己烷，振摇萃取2 min，静置分层，放出下层水相，弃去。将环己烷层从分液漏斗上部倒入5 mL具塞试管中，并用环己烷定容至刻度。
2.3 测定
荧光分光光度计测定条件如下：激发波长380 nm，发射波长523 nm，狭缝10 nm，1 cm测量池。分别测定样液、试剂空白液和硒标准液中4，5一苯并苤硒脑络合物的荧光强度，与标准对照定量。
检测得结果1#样品与2#样品的硒含量分别为8.1μg/kg, 8.5μg/kg, 而茶叶的硒含量为10.6μg/kg。
3 其他主要成分的检测方法均为标准方法，其均侄结果分别如下
氨基酸含量，13.1%
总黄酮（以芦丁计）： 1.2%
多糖： 0.80%
总磷： 0.31%
维生素B1： 135mg/kg
维生素B2： 10.0mg/kg
维生素C： 1.30mg/kg
钙（Ca)： 1280mg/kg
铁（Fe)： 121mg/kg
锌（Zn)： 0.0021%
4 结论
茶叶在微量元素和维生素范围的含量和绞股蓝含量差别不大，但在功效成分总黄酮与多糖远少于绞股蓝，由此可见，绞股蓝有丰富的功效物质使得其有多种保健药用价值，又由于地理环境的影响，紫阳的茶叶与绞股蓝均富硒，使其有独特的功效。绞股蓝各主要功效成分的作用如下：
4.1 绞股蓝皂甙性能
绞股蓝所含皂甙总数有人参的4倍之多，它具有人参的作用，还有人参所没有的作用——清热解毒，又无人参过量服用的副作用。
4.2 黄酮类化合物
在防治动脉粥样硬化方面有较好的疗效。
4.3 绞股蓝多糖
多糖具有复杂面又多方面的生物活性，许多植物多糖对提高机体免疫力、抗癌、抗放射等都有一定作用，在医药领域中越来越受到人们的重视。绞股蓝茎叶中含有多糖。
4.4 绞股蓝磷脂
磷脂类成分对维持生物膜结构的完整及功能，调整人体的生理机能有重要意义。它具有增强免疫功能，补血和促进粥样硬化斑消散，增强胰岛素、骨细胞和神经细胞功能等作用，溶血磷脂酰胆碱尚有抗癌作用。
4.5 绞股蓝氨基酸
业已公认蛋白质、氨基酸为构成机体的重要物质基础。绞股蓝中含有18种氨基酸，包括人体必需的氨基酸和药效氨基酸。
4.6 无机元素
绞股蓝含有23种以上元素。其中13种为人体必需微量元素：铁、锌锰、铬、铜、钼、钴、硒、镍、钒、锶、硅、硼等。同时还含有5种人体必需的常量元素：钙、磷、钾、钠、镁等。绞股蓝中具明显抗癌活性的元素有7种：硼、镁、锰、钼、硒、锌、铜等，这可能是绞股蓝抗多种癌症的重要原因之一，尤其是元素硒在抗癌、保护心血管、防衰老方面有较好的作用。
［参考文献］
［1］ 赵昌琼.绞股蓝的功效说明［J］.西南师范大学学报，2002，28（1）：122～125.
［2］ 张明生.地理环境与植物微量组分关系的研究［J］.中国农业科学，2005，25（1）：13～16.
［3］ 中华人民共和国国家出入境检验检疫局发布进出口茶叶中硒的检验方法荧光光度法［S］.SN／T 0926-2000.