摘 要：采用柱层析的方法对提取的卵磷脂进行纯化，用消化定磷法测定卵磷脂的含量。结果表明，从蛋黄提取的卵磷脂粗品经柱层析纯化，精制卵磷脂的纯度达99.6%。用消化定磷法可以准确测定卵磷脂的含量，有较高的准确度。
关键词：卵磷脂；纯化；含量；测定
1 引言
卵磷脂又称为磷脂酰胆碱，是磷脂酸的衍生物，由甘油与脂肪酸和磷酸胆碱结合而成。卵磷脂广泛分布于动物、植物和酵母中。卵磷脂是构成细胞等生物膜、脑组织和神经组织的重要组成成分[1]，对酶的活性也起重要的作用，而且也是乙酰胆碱的重要供给源[2]。卵磷脂因为其乳化特性和安全性，可用于生产人工血浆、脂乳剂。临床上可用于治疗动脉粥样硬化、脂肪肝、神经衰弱、营养不良、胆固醇结石的防治药物及静脉注射脂肪乳的乳化剂。在食品、化妆品和医药领域有着广泛的用途。
目前，卵磷脂的来源主要是从鸡蛋黄、大豆和猪脑中提取。传统提取卵磷脂的几种方法，如用二甲醚从生蛋黄中提取卵磷脂、用乙醇和酸类从生蛋黄中提取卵磷脂、用丙酮提取卵磷脂和冷冻蛋黄，用乙醇和己烷将卵磷脂与中性脂进行分离，提取卵磷脂等方法，这些方法 提取的卵磷脂达不到食品和医用的高纯度[3]，因此，必须对粗产品或市售的卵磷脂进行纯化。在本工作中，作者采用柱层析的方法对提取的卵磷脂进行纯化，用消化定磷法测定卵磷脂的含量。
2 实验部分
2.1 试剂和仪器
蛋黄卵磷脂（卵PC）（自提）；中性三氧化二铝（200-300目）；硅胶G；氯仿（AR）；甲醇（AR）；乙醚（AR）；浓硫酸（AR）；钼酸铵（AR）；30%过氧化氢（AR）；磷酸二氢钾（AR）；层析柱（Ф
2.2 实验方法和结果
取
在层析柱中装入
标准曲线的绘制：用消化定磷法测定卵磷脂的含量。按表1中的数据娶浓度为5.718mg/mL的磷酸二氢钾标准溶液于小离心试管中，各加入0.5mL 5mol/L的硫酸，于150-160 oC的烘箱中消化3小时，冷却，加入30%的过氧化氢两滴继续消化1小时，冷至室温，加入4.6 mL0.22%的钼酸铵溶液，再加0.2 mLFSR试剂，于100 oC水浴上加热7min，于室温下于810nm测定吸光度A，结果列入表1。
样品的测定：同法测定测定卵磷脂的吸光度，通过回归方程求得卵磷脂中磷的含量，按卵磷脂的摩而质量即可求得卵磷脂的含量。用消化定磷法测定精制卵磷脂的纯度达99.6%。
表1 消化定磷法的标准曲线数据
_______________________________________________________________________________
No 1 2 3 4 5 6 7
_______________________________________________________________________________
KH2PO4 / m l 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00
KH2PO4 /μg 0.000 2.859 5.718 8.577 11.44 14.30 17.15
P/μg 0.000 0.652 1.303 1.955 2.606 3.025 3.909
A 0.000 0.094 0.210 0.334 0.450 0.560 0.675
_______________________________________________________________________________
回归方程为：Y = 0.1753X ―0.01072 R2 = 0.9964
3 结论
采用柱层析的方法对提取的卵磷脂进行纯化，精制卵磷脂的纯度高，可达到食品和医用要求的高纯度。用消化定磷法可以准确测定卵磷脂的含量。
参考文献
[1] Gregoriadis, G., et al: Liposome Technology Vol. I Chapter 18,252-254
[2] 宋启煌，叶云. 超临界CO2卵磷脂的研究. 广东化工. 1999，26（2）：37-38
[3] 张建华，刘荣春. 卵磷脂的提取的实验研究. 中国药业. 1998，7（7）：38-40
[4] The journal of the American oil chemists’ society 1965, 42: 53-56